中国USHER综合征的分子诊断及新发现

USHER综合征是导致盲和聋的遗传性疾病之一，主要是常染色体隐性遗传。USHER综合征根据发病年龄、视力听力受损的严重程度及是否伴有前庭功能障碍，可分为三型:USHI患者的特点是先天性耳聋伴有严重的平衡问题，而且在儿童早期就有视力问题和夜盲；USHII患者的特点是出生就伴有中到重度的听力下降，平衡正常，通常在青春期发现有视网膜色素变性;USHIII患者平衡感正常或不正常，进展性听力下降，视力障碍多变且在青春期进展快。目前已确定有12个致病基因和3个致病位点。临床表现的复杂性和遗传异质性给USH的临床诊断及分子诊断带来了挑战。

欧洲人种USH方面的研究如火如荼，而关于中国人USH方面的研究则很少，仅有的研究也仅局限在MYO7A和USH2A两个基因。为了探究中国USH病人的突变频谱，本研究应用二代测序技术对67个家系的70例患者的所有已知USH基因进行了测序及分析。这也是目前为止纳入中国USH患者最大的队列研究。研究纳入的患者包括14例USHI，54例USHII及高度怀疑USHII及1例USHIII。研究者采用二代测序结合基因捕获的方法对致病基因（MYO7A,PCDH15,CDH23,USH1C,USH1G,USH2A,GPR98,DNFB31,andCLRN1、PDZD7）进行分析，对于没有在上述基因发现致病突变的病人，研究者认为其致病突变可能在新近报道的USH致病基因（CIB2、HARS、ABHD12）中，并对其进行了此三个基因的全部外显子Sanger测序。通过对测序结果进行生物信息学分析、Sanger测序验证及共分离实验等方法以确定致病突变。

研究结果显示70%的纳入研究的患者携带有已知致病基因的双等位基因突变，14例USHI中10例确认有致病突变。在USHI患者中基因MYO7A上的突变最为常见，在本研究中共发现13个致病突变，其中10个是未报道过的突变。USH2A则是USHII患者最常见的突变基因。

USH基因突变示意图：a.USHI患者的突变基因分布；b.USHII患者的突变基因分布。

研究者发现有的患者的致病基因突变是多个，通过分析验证，作者认为听力下降和视力损害可能来自不同的基因，如图2。

患者USHsrf40的双复合杂合突变。患者USHsrf40携带有来自基因MYO7A和基因CGNA1的复合杂合突变:位于基因MYO7A的两个错义突变，位于基因CGNA1的移码突变和错义突变。

此外，研究者首次在中国USH患者发现基因CLRN1,DFNB31,GPR98，PCDH15的致病突变。USH患者许多突变等位基因是有别于其他人种的。研究者还发现USH2A突变的严重程度决定了患者表型（图3）。

USH患者大多都有两个严重致病基因突变。携带有USH2A突变的患者根据严重致病基因突变（移码突变，剪切位点突变，无义突变）的数目分类。和RP患者相比，携带有两个严重突变的USH患者数更多。

该研究是对中国USH患者的综合特征进行的首次大样本量的队列研究，超过90%的患者是由于已知基因的突变导致的，其中77%的致病基因突变是首次报道。研究证实，与单纯视网膜色素变性相比，引起USH的USH2A突变多是移码或缺失\插入突变从而导致蛋白功能丧失。该研究的意义重大，通过分子水平的诊断和患者的临床信息的结合，使得USH患者的精准诊断、预后及个性化治疗成为可能。

Usher综合征（USH）可以导致聋和盲，对患者的生活质量影响巨大。USH1型的患者，由于耳聋出现早，如没有得到及时诊治，将成为聋哑人，他们的视功能的异常很容易被忽略。USH2型及3型的患者，视功能及听力异常均是逐渐进展的，患者分别就诊于不同眼科及耳科，常被诊断为单纯性视网膜色素变性及感音神经性耳聋。该病在我国的漏诊率较高。

新一代基因测序方法为我们揭示患者的基因缺陷提供了便利，但是依然要强调临床信息的准确和翔实。这篇文章通过加大样本的研究，报道了中国USH患者不同于其他种族患者的基因突变特征。对于这样的致残性遗传病，确定致病基因是目前精准医疗时代重点需要关注的问题。精确的临床及分子诊断是判断预后，治疗选择及优生优育的基础。目前诊断Myocin7A所致USH的基因治疗在临床试验阶段，希望不久的将来，新的治疗手段能够大大改善患者的生活质量。