建立持续时间长久的青光眼动物模型

动物模型在医学研究中占据着重要的地位，对于青光眼研究也不例外，更贴近人眼状态的青光眼动物模型是青光眼研究的重要工具。目前，已有多种青光眼动物模型，如激光光凝猴眼小梁网，a-糜蛋白酶、乳胶微珠、透明质酸钠等注入啮齿类动物前房，GPNMB和TYRP1等基因突变的自发高眼压小鼠模型等，这些模型均有自身的优点和不足。

动物模型的目的是更接近自然且成本较低。最近，来自美国Baylor医学院的A.KareemKhan等观察了长时间持续高眼压小鼠模型的神经节细胞（retinalganglioncell,RGC）损伤及视网膜功能情况。

青光眼动物模型的制作方法：6周大C57BL/6J小鼠，左眼前房依次注入1.5ul聚苯乙烯微珠及3ul透明质酸钠，其后每周测量眼压，在第24周，追加1次注射，持续测量眼压至48周。空白对照为前房注入等量生理盐水。RGC的检测：neurobiotin及进行抗Β-微管蛋白（TUJ1）抗体免疫组化。其他检测指标有：眼轴长度、ERG等。

结果：实验组小鼠眼压升高，眼压波动较平稳且只有极少数≥30mmHg峰值（图1）。眼轴：24周增加0.14mm，至48周增加0.19mm，主要在前6周增长明显。RGC数量随时间延长而减少，但前24周减少较后24周减少显著（图2）。ERG显示暗适应b波振幅较正常轻度增加，标准化后的正向暗适应阈值反应（positivescotopicthresholdresponse,pSTR）振幅降低（图3）。

讨论：1、本动物模型眼压波动较小，峰值升高不明显，可以避免急剧高眼压造成的眼部病变，如炎症反应、白内障等。2、RGC减少在前24周比较显著原因可能为C57BL/6J小鼠存在抵抗高眼压造成的损伤及老年鼠对IOP增高的敏感性降低等遗传特质。所以在实验的24W-48W，RGC胞体的数量减少不显著。3、实验眼ERG的b波振幅增高原因可能为高眼压首先对无长突细胞、Müller细胞造成损伤，使相应细胞产生的负波成分减少，从而正向的b波振幅相对增加。4、pSTR由RGC产生，本研究通过标准化pSTR振幅，观察到IOP持续升高过程中，pSTR振幅均有下降，且与IOP累积升高程度相符。结合RGC数量减少在后24W不明显的结果，说明在眼压升高的后期，对RGC在功能上的影响较组织学更为显著。

本研究的青光眼小鼠模型相对于之前的研究，IOP增高持续时间显著延长（48W），为研究青光眼病程中不同时间点的病理变化提供基础。但仍存在不足之处：需要补充注射一次以维持高眼压状态；没有测量在各个时间点的24小时眼压波动情况及与人眼的病理状态比较等。

原文：KhanAK,TseDY2,vanderHeijdenME.Prolongedelevationofintraocularpressureresultsinretinalganglioncelllossandabnormalretinalfunctioninmice.ExpEyeRes.2015Jan;130:29-37.

短评：

青光眼动物模型对于青光眼疾病机制和新的治疗方法的研究都非常有价值。啮齿类动物，大鼠和小鼠的视神经乳头的结构和血管与灵长类动物有一定的相似性，对于人类青光眼的研究有一定的价值。尤其是其星形胶质细胞,视网膜神经节细胞轴突和视神经乳头结缔组织的相互关系非常类似灵长类动物，特别适合研究轴突损伤的细胞机制。

青光眼是全球首位的不可逆性致盲性眼病，可以根据眼压的升高分为高眼压性青光眼（HTG）和正常眼压性青光眼（NTG），青光眼动物模型也可以分为HTG和NTG。已经报导的NTG模型往往是一些人类NTG相关基因和无关基因的转基因小鼠，例如OPA小鼠，AD小鼠等，它们都能表现青光眼性视网膜神经节细胞的改变，但是没有眼压的升高。

眼压升高是青光眼的主要危险因素，也是唯一得到证实有效的可控青光眼因素，是青光眼治疗的主体。实验性高眼压动物模型对于发现和研究眼压诱导的视神经损伤机制很有价值。

高眼压动物模型有许多种，这些模型升高眼压的机制各有不同，因此其眼压水平和视神经损伤程度的相关性也有所不同，也有各自适合的损伤评价方法，比如视神经组织学，视网膜神经节细胞计数，一些分子生物学技术等等，在青光眼神经保护例如药物和基因研究有很大的帮助。

本文所介绍的动物模型，小鼠，2次眼前房注射聚苯乙烯微珠及透明质酸钠，眼压持续稳定升高达到48周；有显著的眼轴增加；RGC数量随时间延长而减少。ERG显示暗适应b波振幅较正常轻度增加，标准化后的正向暗适应阈值反应（positivescotopicthresholdresponse,pSTR）振幅降低。证实在小鼠，慢性眼压升高能够导致视网膜神经节细胞的丢失和异常视网膜功能。这种慢性高眼压模型是对青光眼动物模型研究的很好的补充。

高眼压状态下，眼部的代谢性改变也和视网膜功能损伤相关，今后对于高眼压性代谢状态的研究以及慢性高眼压状态下视神经，巩膜，筛板等结构的动态改变的研究必将加深对青光眼病理机制的认识，动物模型的作用也会进一步凸显。