肿瘤特异性T细胞—肿瘤微环境中的战士

随着实体肿瘤生长过程中新生血管的不断形成，免疫细胞得以进入实体肿瘤内部，成为肿瘤浸润白细胞（Tumor Infiltrating Leukocytes,TIL）。TIL一直引起肿瘤免疫学者的广泛兴趣，在于长期以来的临床观察中被认为与较好的治疗预后有密切关联，具有对抗肿瘤的作用，在肿瘤免疫治疗应用中具有前景。

越来越多研究表明，TILs是具备高度异质性的细胞群体，由占绝大多数的T细胞，少量的B细胞和NK细胞构成。其中，CD3作为T细胞的标记物，几乎见于所有的肿瘤浸润T细胞中，其中主要的T细胞亚型包括CD8+细胞杀伤T细胞(CTL),CD4+辅助T细胞(Th),CD45RO+记忆T细胞(Tm)和FOXP3+调节T细胞(Tregs)。

TIL的异质性导致不同细胞亚群，甚至相同的细胞亚群在不同的组织来源肿瘤、不同微环境条件下表现出不同的功能，因此需在充分了解异质性的基础上讨论不同群体在肿瘤微环境中的不同生理及病理效应。

细胞毒性白细胞与抗肿瘤

CD8+T细胞在细胞介导的肿瘤杀伤中发挥重要作用，特别是表达颗粒酶B的细胞毒性白细胞（CTLs）的大量浸润，在肺癌、黑色素瘤、直结肠癌及卵巢癌等多种癌症中均发现有较好的预后表现。在肿瘤浸润白细胞中，有一类T细胞们对肿瘤标记物具备特异性识别能力，对肿瘤细胞具有高反应性，被称为肿瘤特异性T细胞（Tumor-specificTcell），在基础研究和临床转化中具有独特的价值。

肿瘤微环境与肿瘤免疫疗法开发

肿瘤微环境（TME）成分复杂，将具备肿瘤识别、对抗肿瘤能力的T细胞从微环境中分离出来，去除如Treg细胞等因素的抑制和避免过早耗竭，给予适宜条件体外扩增后的肿瘤特异性T细胞回输，可实现肿瘤杀伤的功能，这在黑色素瘤临床试验中表现出极好的治疗效果。

肿瘤特异性T细胞的价值还在于，可协同免疫检查点抑制剂的治疗方法。实体肿瘤内部存在浸润T细胞是使用免疫检查点抑制剂治疗的前要条件：无有效浸润T细胞的存在，好比无作战士兵，检查点抑制的方法无法起效。

DC细胞与诱导肿瘤特异T细胞

增强肿瘤内CTLs的聚集需要从两方面同时入手：既需要产生大量可识别肿瘤的T细胞，也需要调节肿瘤微环境各成分，使CTLs有效进入肿瘤内部。前者可通过激活内源性抗原呈递细胞（APC）以达到预激活肿瘤抗原特异的CD8+T细胞，增强局部趋化因子的产生，增强CTL富集的作用。而这一系列级联反应必须以DC细胞有效识别肿瘤细胞、诱导IFNs分泌并自身释放IL-12为前提。DC细胞可在Toll-样受体配体、趋化因子、死亡或细胞受损后释放的模式样蛋白分子（Damage-associated pattern molecules）和其他免疫细胞（T、NKT）的信号条件下成熟，DC（CD11c+）成熟对于成功诱导T细胞免疫功能非常重要。在获取肿瘤特异性T细胞过程中，向未成熟DC细胞提供合适的肿瘤抗原，常用的做法是采用肿瘤裂解物或经辐照过的肿瘤的细胞，这样可以包含病患特异的肿瘤抗原信息。

带有肿瘤抗原信息的DC细胞，皮内注射、淋巴管内注射或超声引导的淋巴结内注射均可获得更好的向淋巴结迁移效率；肿瘤内直接注射成熟DC细胞则较好诱导局部CD8+T细胞的预激活（Priming）。

利于杀伤T细胞富集的肿瘤微环境调节

除了诱导大量肿瘤特异T细胞的产生，浸润肿瘤实体并出现免疫反应，在抗肿瘤免疫治疗疗效评估中更为明显，可采用四聚体法或ELISpot法。临床实验结果显示，T细胞共刺激因子（如CD40,4-1BB）、使用环氧化酶-2抑制剂进行Treg细胞、髓源性抑制细胞(MDSC)的功能性抑制，均可实现对肿瘤微环境的调节，而获得很好的CTL向肿瘤内浸润并发挥抗肿瘤活性。