一小滴体液中含细胞的数量很少,往往不足以用于癌症的检测,如今,采用一种只需要少量DNA样本就可对多个基因进行分析的新方法克服了这一难题。这种分子水平上的测试尤其对于检测breastfluid的癌细胞非常有用。
对于少量的乳腺组织样本进行预实验的结果表明这种方法能对少至50个细胞的组织样本进行癌症检测,这一新的检测方法发表在7月这一期的CancerResearch上。“我们的目标是使用分子学的方法帮助解决癌症诊断中样品不足的难题,以及显微镜检观察不清晰的困难”,约翰霍普金斯大学Kimmel癌症中心的肿瘤学BarbaraB.Rubenstein教授。
Sukumar博士说,“如果更多的研究证实这种检测方法的可行性,那么它能对细胞病理学与乳房造影法(早期胸部肿瘤X射线透视法)这些常规的癌诊断方法提供一些分子线索,帮助确定有无癌的迹象。”
这一方法被称为定量多重甲基化特异性PCR(quantitativemultiplexmethylation-specificPCR,QM-MSP),这种方法的特点是可以特异地寻找DNA序列中甲基化程度高的区域。甲基基团通过结合到开启基因的开关位置,可以调控DNA信息的转录和翻译,这个过程称为甲基化。甲基化异常会错误地关闭某些基因,从而最终导致原本正常细胞中某些关键蛋白的缺失,加上一系列遗传事件的发生,最终引发癌症产生。
“此前,同时精确定量多个基因的甲基化程度还是不可能的,必须要经过重复多次实验才能实现。更何况在没有足够的样本的情况下就不能进行这种重复实验”,论文的第一作者KimmelCancerCenter的副研究员Fackler博士说,“如今,我们将现有的两种类型的MSP方法融合在一起,从而最大程度减少了所需样本的量。”
QM-MSP能同时检测4-5个乳腺癌基因中每一个基因的甲基化程度。将这些百分比累计在一起后与阀值比较,若超过阀值水平则表明可能存在癌细胞,反之,则说明样本正常。
在实验中Hopkins的科学家们首先对组织样本中一组已知甲基化异常与乳腺癌相关的基因进行QM-MSP检测,结果表明这种方法检测出乳腺癌的准确率84%(19个乳腺癌样本中能够正确检测出16个),对正常样本对照检查的准确率为89%(9个正常样本中的8个没有检测到癌细胞迹象)。
接着研究小组对乳腺管液(breastductfluid)样本进行QM-MSP检查,这些体液样本是从乳管灌洗(ductallavage)过程中得到的。7个乳腺癌风险高但是没有发现癌症的样本中,有6个检测不到甲基化异常,有一个只检测到某一个基因存在较低水平的甲基化异常。用QM-MSP方法对4个乳腺癌病人进行检测,能够检测出两个样本中的癌细胞,研究者说这表明这一检测方法有一定的应用前景,现在JohnsHopkins科学家正在对这种方法进行大量的研究评估。
Hopkins的研究小组认为QM-MSP技术能被运用于其它癌症的甲基化分析,比如从口腔灌洗液中检测头颈癌细胞、从痰液中检测肺癌等等样品量通常较少的检查中。
(实习编辑:伊玥)
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