肠道病毒所致各系统感染

肠道病毒所致各系统感染的检查：

（一）周围血象白细胞计数大多正常，在某些肠道病毒感染时可增高，中性粒细胞也可增多。
（二）病毒分离一般都采取咽拭及粪便作病毒分离和检定，尚可从病人的脑脊液、胸水、心包积液、血液、疱浆以及活检或尸检取得的组织中分离到病毒。标本取得后，应立即送检。可接种于猴肾、人胚肾、人羊膜、人二倍体或Hela细胞、KB传代细胞中进行组织培养，观察细胞病变。同时用多种组织培养细胞进行分离可提高阳性率。阳性标本再以特异型的免疫血清作中和试验进行型别鉴定。疑有柯萨奇A组病毒感染者，应将标本经皮下、腹腔内或脑内途径接种乳鼠进行病毒分离，因其组织培养阳性率不高。柯萨奇B组病毒亦可使乳鼠致病。
（三）血清免疫学试验采取双份血清，测定型特异抗体水平。一般可用中和试验、补体结合试验、酶联免疫吸附试验（ELISA，酶标法）、放射免疫等法进行测定，其中以中和试验最为可靠，中和抗体消失最慢，型特异性也较强。如恢复期抗体水平比早期有≥4倍上升，则有极大的诊断意义。但因肠道病毒型别众多，血清学中和试验工作量大，只有当某地一已知型肠道病毒流行时，以此法进行诊断比较理想。
（四）免疫荧光快速诊断法以荧光染色的免疫抗体来鉴定抗原可达到快速诊断的目的。但目前除在脊髓灰质炎病毒感染时应用外，在肠道病毒感染时采用不多，因需备各种型特异的免疫血清，手续繁多。最近采用许多血清型共有的VP3-ZC抗原和一种与多血清型的VP1衣壳蛋白交叉反应的单克隆抗体，改进了免疫诊断方法，但目前仍停留于研究阶段。
（五）核酸杂交法由于不同血清型的肠道病毒基因组间存在同源性，特别是5′端非编码区部分区域高度保守，故可供核酸杂交，使近年来对肠道病毒鉴定有了新的飞跃。采用探针有以下三种：①cDNA探针，以病毒RNA某一片段为模板，由逆转录酶催化产生，大多克隆在质粒载体中，再把带有显色基因（生物素或地高辛）或同位素的核苷酸掺入到新合成的cDNA链中去，加以标记，若将标本先经12～24小时组织培养可提高阳性率。②RNA探针-由于RNA是单链分子，故它与靶序列的杂交反应效率极高，一般用特异的转录载体克隆肠道病毒RNA探针，混合几种RNA探针可使检测病毒型更广，RNA探针在特异性和敏感性方面都优于cDNA探针。③寡核苷酸探针，较上述二种探针有下面优点。因其链短，与等量靶位点完全杂交时间短，且可识别靶序列内一个碱基的变化，可检测点突变，又可大量合成，价廉。此探针因选择5′端非编码区共同序列，故可牢固而特异地同大多数临床常见肠道病毒结合。为了克服标本中肠道病毒滴度太低的问题，近年采用PCR法将单一基因或短DNA序列放大，再与探针杂交，此法已应用于临床。在肠道病毒中枢神经系统感染流行时，从脑脊液中检测肠道病毒RNA，阳性率高，可在24小时内得结果，比病毒培养平均需6～8天快得多。临床标本用PCR扩增后，再与非同位素标记肠道病毒探针杂交，数小时即有结果，大大有助于临床确诊。