β-促黑素细胞激素概述
人体分泌腺有垂体、甲状腺、肾上腺等,β-促黑素细胞激素直接来源于内分泌腺,所以测定体液中的激素含量更能反映内分泌腺的功能。尤对某些临床症状不明显的病人,其诊断意义更大。
β-促黑素细胞激素正常值
RIA法:20-110ng/L(20-110pg/ml)。
β-促黑素细胞激素临床意义
(1) 升高:阿狄森病(ADDISON病)、先天性肾上腺素增生症、肾上腺切除术后垂体肿瘤(奈尔森氏综合征NELSON病)、ACTH-MSH异位内分泌综合征。
(2) 降低:肾上腺皮质肿瘤。
β-促黑素细胞激素检查方法
本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。
(1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。
(2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。
①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体,使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉,一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。但第二抗体用量较大,成本较高。此外血清浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。
②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白质处于等电点状态,水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速,缺点是非特异沉淀物较多,分离不完全。
③第二抗体-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀优点,且保持第二抗体特异性沉淀的作用,又减少第二抗体用量,并降低PEG浓度,使非特异沉淀物减少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性将小分子的游离部分吸附。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。在抗原与抗体反应后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游离抗原吸附在活性炭颗粒上,离心使颗粒沉淀,上清液中含有结合的标记抗原。
(3)放射性强度测定:B和F分离后,即可测定其放射性强度。测量仪器有两类:液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数,单位为cpm(脉冲数/min)。
每次测定均需作一标准曲线图,以标准抗原的不同浓度为横坐标,以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F,亦可采用计算值B/BF、B/F或B/B0。标本应作双份测定,取其平均值,在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。
β-促黑素细胞激素注意事项
黑素细胞刺激素释放因子(MRF)刺激垂体黑素细胞刺激素(MSH)的分泌,其化学结构可能为5肽。