隐球菌病补体结合试验概述
新生隐球菌(cryptococus neoformans)系半知菌亚门、芽生菌纲、隐球酵母目、隐球酵母科、隐球酵母菌属中真菌。本属中虽种类较多,目前认为主要病原真菌为新生隐球菌。本菌广泛分布于自然界,属土壤真菌,但常寄生于鸟类特别是鸽子的粪便中。新生隐球菌易侵犯中枢神经系统,原发灶主要为肺,少有皮肤或粘膜。患者中有50%以上是与白血病、何杰金氏病、糖尿病以及艾滋病有关,另外脏器移植者也易感染。细胞免疫功能低下是诱发本病的重要原因。
隐球菌病补体结合试验正常值
阴性。
隐球菌病补体结合试验临床意义
阳性新型隐球菌感染(中枢神经系统和全身性)。
结果阳性可能疾病:隐球菌病。
隐球菌病补体结合试验检查方法
(1)补体和溶血素的滴定。
①取补体1ml,加BBS 9ml,依次稀释成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同时取50%的溶血素 0.2ml,加BBS 9.8ml,即为1∶100的溶血素,然后继续稀释成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。
②采取方阵排列试管,纵行各管加不同浓度的补体0.1ml,横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后,各管加BBS 0.2ml,补体和溶血素对照管各加BBS0.3ml,最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml,摇匀,放37℃水箱中30min,观察结果。
以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。上表(表1)中溶血素1∶3200为一个溶血素单位,补体1∶80为一个补体单位。在实际应用时,溶血素用2u(3200÷2=1600),补体用2.5u(80÷2.5=32)。
(2)正式试验:
①用V型微量反应板操作,每份标本作一个试验孔,一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。
②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋转后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀释。
(3)结果判断:凡对照组各管的结果应符合以下情况,否则应重做。
补体对照管:2.5u=0,1u=0~±,0.5u=3~4。羊红细胞对照管:4。抗体对照管:0。阴性对照管;1∶2~1∶256=0。阳性对照管:同一份阳性血清,每次结果应一致。
当各测定管反应最强一管仍为±报告可疑,1~4报告阳性。如测定管和血清对照管均抗补体,全部测定管皆为0,报告阴性。
检查抗体的方法与检查抗原的方法一样,只是改用4个单位已知抗原,藉以测定被检血清。
隐球菌病补体结合试验注意事项
有人认为隐球菌的出现对艾滋病的诊断有一定参考价值。