半胱胺酸试验概述
布鲁菌属是牛、羊、猪等动物的致病菌。人类对布鲁菌十分易感,临床表现为间歇性发热,因此又称波浪热。病后在体液中出现凝集素、沉淀素、调理素、补体结合抗体和血液抗体等,因此常依靠血清学方法进行诊断。危害人类及家畜的布鲁菌属主要有:马尔他(羊)布鲁菌、流产(牛)布鲁菌及猪布鲁菌3个种,它们都含有不同比例的M(马尔他)和A(流产)两种菌体抗原。通常只需使用1种布鲁菌即可测出对3种布鲁菌的任何一种抗体。此外布鲁菌尚有一种表面抗原,可与土拉热(野兔热)、霍乱、结肠炎耶氏菌病患者的血清发生交叉凝集,因此凝集反应的价值,不如肥达试验可靠。补体结合试验的特异性较高,但该种抗体(主要为IgG)出现较晚,维持时间长,对慢性布鲁菌病的诊断意义较大。
半胱胺酸试验正常值
0-1∶25。
半胱胺酸试验临床意义
>1∶25为阳性,布氏杆菌病。
半胱胺酸试验检查方法
荧光素标记法, 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行, 缓冲液洗 3min/2 次,为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 缓冲液洗 5min/2 次, 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。
半胱胺酸试验注意事项
由于血清凝集试验操作简单,抗体(IgM)出现早,效价高,在布鲁菌病的血清学诊断中,仍最为常用。血清凝集试验的方法有试管稀释法和快速玻片 法两类。目前多数采用美国国立研究院(NRC)所推荐的标准化抗原和试管凝集试验技术。玻片试验和其他快速试验只能用于初步筛选。 <1∶25:1∶25-1∶50为可疑;1∶100为弱阳性;1∶200-1∶400为阳性。 ≥1∶800为强阳性。