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细胞角质蛋白19片段

细胞角质蛋白19片段概述

细胞角蛋白是细胞体的中间丝,是细胞结构的主要成分,根据其分子量和双向二维电泳中等电点的不同可以分为20种不同类型,它能在正常上皮、肿瘤细胞、细胞培养中分化不同的上皮细胞表达。CYFRA21-1由细胞角蛋白19片段的两个单克隆抗体组成,即单抗BMl9-21和KSl9.1,是一个分子量为4kD的酸性细胞蛋白。它主要分布于单层和复层上皮肿瘤细胞的胞浆内,当细胞死亡时,它以溶解片段的形式释放入血清中。

细胞角质蛋白19片段正常值

  • ≤3.3μg/L。

细胞角质蛋白19片段临床意义

  • (1)肺癌患者,尤其是NSCLC患者的血清及胸水中 CYFRA21-1浓度升高,其敏感性随病情进展而增高,与肺癌的分期呈正相关。从组织学的角度来看,它对鳞癌的敏感性高于腺癌及SCLC。同时,CYFRA21-1也是肺鳞癌生存及复发的一种独立预后因素。因此,CYFRA21-1检测对非小细胞肺癌患者的诊断、病情监视和疗效判断有较高的临床应用价值。
    (2)血清CYFlRA21-1增高还可见于乳腺癌、膀胱癌、胆道癌、胰腺癌等肿瘤性疾病,亦可见于少数肺气肿、支气管炎、消化性溃疡、肝良性疾病等。

细胞角质蛋白19片段检查方法

  • 本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。
    (1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。
    (2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。
    ①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体,使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉,一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。但第二抗体用量较大,成本较高。此外血清浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。
    ②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白质处于等电点状态,水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速,缺点是非特异沉淀物较多,分离不完全。
    ③第二抗体-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀优点,且保持第二抗体特异性沉淀的作用,又减少第二抗体用量,并降低PEG浓度,使非特异沉淀物减少。
    ④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性将小分子的游离部分吸附。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。在抗原与抗体反应后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游离抗原吸附在活性炭颗粒上,离心使颗粒沉淀,上清液中含有结合的标记抗原。
    (3)放射性强度测定:B和F分离后,即可测定其放射性强度。测量仪器有两类:液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数,单位为cpm(脉冲数/min)。每次测定均需作一标准曲线图,以标准抗原的不同浓度为横坐标,以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F,亦可采用计算值B/B+F、B/F或B/B0。标本应作双份测定,取其平均值,在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。

细胞角质蛋白19片段注意事项

  • 观察临床肺癌手术及放、化疗前后疗效的动态监测,是一项重要的辅助指标。

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