唾液分泌型免疫球蛋白概述
唾液中的免疫球蛋白主要是SIgA和SIgG。静止性唾液中SIg含量常高于刺激性唾液。常采用RIA和单向扩散法测定。儿童唾液的SIgA和SIgG含量明显低于成人,随年龄递增,16岁后接近成人水平。
唾液分泌型免疫球蛋白正常值
儿童唾液的SIgA和SIgG含量明显低于成人,随年龄递增,16岁后接近成人水平。
唾液分泌型免疫球蛋白临床意义
(1)Ig增高唾液腺的炎症、恶性肿瘤等可破坏血液-唾液屏障,使血液中的Ig进入唾液,使SIgA、SIgG、SIgM均可增高。某些病毒感染如麻疹早期,可从唾液中检出特异性SIgA型抗体,有助于诊断。sjogren综合征属自身免疫性疾病,主要侵犯外分泌腺,使唾液中SIgA增高。口腔局部炎症亦可增高。
(2)Ig减低病理性唾液Ig减低见于原发性或继发性免疫缺乏病如先天性丙种球蛋白缺乏症、原发性选择性SIgA缺乏症、应用免疫抑制剂和放射治疗时,龋齿患儿及大量吸烟者SIgA也可降低。
唾液分泌型免疫球蛋白检查方法
本法分三个步骤,即抗原与抗体反应、B和F分离和放射性测定。
(1)抗原与抗体反应:将标本(非标记抗原)、标记抗原和抗血清顺序定量加入小试管内,置室温(15~30℃)作用24h,使其充分竞争结合。
(2)B、F分离:分离技术多种多样,常用沉淀法。
①第二抗体沉淀法:又称双抗体法,在受检抗原与第一抗体特异性反应后加入相应的第二抗体,使形成的抗原-第一抗体-第二抗体的复合物共沉,一经离心即可使结合标记抗原B与游离抗原F分离。本法是特异性沉淀,分离完全,非特异性结合力低。但第二抗体用量较大,成本较高。此外标本浓度、抗凝剂的有无因素可在一定程度上影响结果。
②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白质处于等电点状态,水化层破坏而导致蛋白质沉淀。本法优点是PEG制备方便、价廉、分离快速,缺点是非特异沉淀物较多,分离不完全。
③第二抗体-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀优点,且保持第二抗体特异性沉淀的作用,又减少第二抗体用量,并降低PEG浓度,使非特异沉淀物减少。
④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性将小分子的游离部分吸附。如在活性炭表面涂上一层葡聚糖,使它表面具有一定孔径的网眼,从而允许小分子游离抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子复合物则被排斥在外。在抗原与抗体反应后,加入葡聚糖-活性炭,放置5~10min,使游离抗原吸附在活性炭颗粒上,离心使颗粒沉淀,上清液中含有结合的标记抗原。
(3)放射性强度测定:B和F分离后,即可测定其放射性强度。测量仪器有两类:液体闪烁计数仪(测β射线)和晶体闪烁计数仪(测γ射线)。计数单位是探测器输出的电脉冲数,单位为cpm(脉冲数/min)。
每次测定均需作一标准曲线图,以标准抗原的不同浓度为横坐标,以测到的相应放射性强度为纵坐标作图。放射性强度可任选B或F,亦可采用计算值B/B+F、B/F或B/B0。标本应作双份测定,取其平均值,在标准曲线上查出相应的受检抗原浓度。
唾液分泌型免疫球蛋白注意事项
放射免疫测定具有灵敏度(可测定钠克甚至皮克水平)、特异性强(可分辨结构类似的抗原)和准确性好(钠克量的回收率接近100%)。