支气管肺泡灌洗术(BAL)概述
支气管肺泡灌洗术(BAL)通过纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收,对其进行一系列检测和分析,从而获得下呼吸道病变的性质特点和活动程度,有助于确立诊断。
支气管肺泡灌洗术(BAL)正常值
正常。
支气管肺泡灌洗术(BAL)临床意义
肺部感染,特别是免疫受损、免疫缺陷肺部感染的病原学诊断,弥漫型和周围型肺部肿瘤的细胞学诊断,间质性肺疾病,如结节病、特发性肺间质纤维化、外源性变应性肺泡炎、肺泡蛋白沉着症、胶原血管伴肺纤维化等的诊断、治疗、疗效和预后估计。
以纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段水平,反复以无菌生理盐水灌洗、回收的一项技术,对其回收液进行细胞学、生化学、酶学和免疫学等一系列检测和分析。
1.全肺灌洗用于肺泡蛋白沉着症、矽肺、肺泡微石症、哮喘持续状态等的治疗。
2.肺段灌洗主要用于弥漫性间质性肺纤维化、石棉肺和卡氏肺囊虫肺炎的诊断,对弥漫性肺泡癌的诊断,也有重要价值。
支气管肺泡灌洗术(BAL)检查方法
检查操作
1、术前3-4h禁食。术前30min肌注地西泮(安定)10mg及阿托品0.5mg。
2、2%利多卡因鼻腔、气道局部粘膜麻醉。
3、纤维支气管镜经鼻腔插入气管,嵌入右肺中叶或左肺舌叶段支气管管口(局限性肺病变应选相应支气管肺泡段),注入2%利多卡因2-3ml局麻后,用50ml注射器将37℃生理盐水分次注入,每次25-50ml总量100-300ml,注入后立即通过负压吸引装置吸引、回收至硅质灌洗液收集瓶内。一般回收液量应达注入液量的40%-60%。
4、回收液用双层无菌纱布过滤,除去粘液,记录总回收液量,装入硅质容器中,置于冰水(-4℃)中送检验室,应在2-3h内对灌洗液进行检查、分析。
支气管肺泡灌洗术细胞学检查方法
(1)BALF细胞总数和分类计数检测
①将上述回收灌洗液装入塑料离心管内以1200r/min,在4℃下离心10min,上清(原液或10倍浓缩)-70℃储存,用做可溶性成分的检测。
②经离心沉淀的细胞成分用Hank液(不含Ca2+、Mg2+)在同样条件离心冲洗2次,每次5min。弃去上清后加Hank液3~5ml制成细胞悬液。也可以用灌洗液原液减少细胞丢失。
③然后在改良的Neubauer计数台上计数BALF中细胞总数,一般以1×106/ml表示。如果细胞数过高时,再用Hank液稀释,调整细胞数为5×106/ml,并同时将试管浸入碎冰块中备用。
④细胞分类计数,采用细胞离心涂片装置,加入备用细胞悬液(细胞浓度为5×106个/ml)100μl,在4℃下以1200r/min离心10min,通过离心作用将一定数量的BALF细胞直接平铺于盐载玻片上。取下载玻片立即用冷风吹干,置于无水乙醇中固定30min后进行染色,一般用Wright或HE染色。
⑤在40倍光学显微镜下计数200个细胞,进行细胞分类计数。
(2)BALF中T淋巴细胞亚群的检测
①采用间接免疫荧光法,将上述获得的BALF细胞成分,用10%小牛血清RPMI 1640培养液3~5ml制成细胞悬液。
②将细胞悬液倒入平皿中,置于5% CO2 37℃培养箱中孵育2h,进行贴壁处理,去除肺泡巨噬细胞。
③取出细胞悬液,再用Hank液冲洗离心1次,弃上清留20~100μl。经贴壁处理后的细胞悬液中,肺泡巨噬细胞显著减少,淋巴细胞相对增多。
④将经贴壁处理的细胞悬液分装3个小锥形离心管内,每管20~30μl,用微量加样器向标本中加单克隆抗体CD3、CD4和CD8各20~40μl,混匀置于4℃冰箱中作用1~2h。
⑤取出标本,先用Hank液冲洗离心2次,以12000r/min离心20s,然后加羊抗鼠荧光抗体各20~40μl,置于冰箱作用30min。
⑥取现标本用Hank液以同样速度和时间离心冲洗2次,弃上清留20μl充分混匀细胞,取1滴于载玻片上加盖玻片。荧光显微镜下数200个淋巴细胞并计算出标有荧光的细胞阳性率。
支气管肺泡灌洗术(BAL)注意事项
1、严格掌握适应证,年老、体衰患者检查中应以心电图及经皮检测血氧饱和度进行监护。术中给予鼻导管吸氧或高频通气供氧。
2、术中严格无菌操作,防止继发感染。
3、按要求正规操作,合格的灌洗液应达到规定的回收量,不混有血液(红细胞数<10%),不应混有多量上皮细胞(<3%)。
4、获得灌洗液后尽早送检。
5、检查后出现发热、出血、肺部感染、支气管痉挛等并发症时,作相应处理。