α-羟丁酸脱氢酶

α-羟丁酸脱氢酶概述

α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)与LDH关系十分密切，实际上它是LDH同工酶Ⅰ型，因其对α-酮丁酸亲合力高，所以当以α-酮丁酸作为底物时，所测LDH的活性特称为α-羟丁酸脱氢酶活性。α-HBDH测定方法主要有比色法和连续监测法。 

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α-羟丁酸脱氢酶正常值

• 1、比色法61～155U/L(37℃)。
  2、连续监测法72～182U/L。 

α-羟丁酸脱氢酶临床意义

• α-HBDH的活性与LDH的活性变化一致，但更能反映LDH1的活性变化，其特异性比总LDH活性高。与LDH、AST、CK、CK-MB构成心肌酶谱，对诊断心肌梗死更有意义。
  1、心肌梗死时α-HBDH活性明显升高，且维持时间较LDH长，LDH/α-HBDH比值(0.8～1.2)低于正常对照(1.2～1.6)。
  2、鉴别肝病和心脏病。肝病和心脏病时LDH均可升高，但肝病时α-HBDH活性变化不大，LDH/α-HBDH比值可升高至1.6～2.5，而心脏疾病时α-HBDH则明显升高。
  3、营养不良、叶酸和维生素B12缺乏时，α-HBDH活性亦可升高。 

α-羟丁酸脱氢酶检查方法

• 1、比色法：按步骤进行操作。
  混匀，在10～30min内，以490nm波长，光径1cm，蒸馏水调零比色，以AU-AC之差值，查标准曲线得酶活力单位。
  2、连续监测法：
  (1)取血清0.05ml，加入NADH溶液2ml，37℃水浴10～15min，使NADH非特异性氧化完成。
  (2)加入预温至37℃的α-酮丁酸0.1ml充分混合，立即倒入37℃恒温比色杯内监测。340nm波长，1cm光径，空气调零。
  (3)如△A/min>0.08，用磷酸盐缓冲液稀释血清5或10倍后重测。 

α-羟丁酸脱氢酶注意事项

• 1、比色法：
  （1）Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法，以国际单位(U/L)计算。上述方法是37℃比色法，为使各方法间结果有更好的可比性，可转换成30℃连续监测法的相应单位。37℃转换成30℃温度系数为0.87。
  （2）因红细胞内该酶活性高，应在2h内及时分离血清，标本不能溶血。4℃酶活性稳定不少于7天。
  （3）可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆，草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。
  2、连续监测法：
  （1）此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐，其最适底物浓度为15mmol/L(25℃)，反应混合物的最终浓度：磷酸盐65.4mmol/L、NADH 0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L，样品容积组分比0.023。改为37℃测定结果与LDH相关性较好。
  （2）α-酮丁酸钠较稳定，α-酮丁酸长期存放，其缩合物可抑制酶促反应。
  （3）国内商品试剂盒的方法，一般是在操作前将α-酮丁酸与NADH溶液混合，置反应温度条件下数分钟后，作为单一试剂取出一定量加入样品中，延迟时间30s后，监测3min。