肝络欣丸由蚂蚁、黄芪、人参、枸杞子、黄精、丹参、白术、地黄、赤芍、当归、蒲公英、虎杖、秦艽、苍术、猪苓、陈皮等20味中药精制而成。那么,肝络欣丸的鉴别方法为什么呢?
肝络欣丸的鉴别方法为:
1.取本品,置显微镜下观察:体壁(几丁质外骨骼)碎片半透明淡褐色或淡黄色,不规则多边形或边缘具缺刻,碎片表面有多角形网格样纹理及纤毛,有少量腔节和附节残段;棍棒状,筒状或刺状,其上具有细毛。纤维成束或散在,纤维断端常纵裂成帚状。种皮石细胞淡黄色,壁较薄,内壁稍弯曲,直径34-103μm。薄壁组织间散有多数大的粘液细胞,内含草酸钙针晶束。可见散在菌丝及粘结之菌丝团块,遇水合氯醛菌丝团块溶化露出菌丝。
2.取本品3g,加硅藻土1.5g,研匀。加醋酸乙酯30ml,摇匀,放置过夜,滤过,滤液置水浴上蒸干,残渣加醋酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。另取蚂蚁对照药材1g,加醋酸乙酯20ml,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-乙醚(7:3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷酸溶液,在110℃烘约10分钟,供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上,显一个相同的粉红色斑点。
3.取本品10g,加硅藻土4g,研匀。置索氏提取器中,加乙醚提取至提取液无色,分取乙醚提取液,备用,药渣挥干,再加甲醇提取至提取液无色,甲醇提取液置水浴上蒸干,残渣用水50ml分次转移至分液漏斗中,加水饱和的正丁醇提取4次,分次20ml,合并正丁醇液,用0.5%氢氧化钠溶液洗涤3次,每次10ml,弃去氢氧化钠液,正丁醇液继续用正丁醇饱和的水洗至中性(乳化严重时,可加稀盐酸1-2滴),弃去水液,正丁醇液置水浴上蒸至约40ml,加入活性炭1g,搅匀,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取人参对照药材1g,加正丁醇30ml,置水浴上加热回流1小时,放冷,滤过,滤液用0.5%氢氧化钠溶液洗涤2次,每次10ml,弃去氢氧化钠液,继用正丁醇饱和的水洗至中性,正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rg1、Re、Rb1对照品,加甲醇分别制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各5μl,对照药材溶液3μl,对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开(预饱和15分钟),取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃烘至斑点显色清晰,分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点;在与各对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点或荧光斑点。
4.取[鉴别]3项下备用的乙醚提取液,挥干,残渣加乙醚10ml使溶解,作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5g,加乙醇10ml,超声处理20分钟,滤过,滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液10μl,对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-醋酸乙酯(9:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色荧光斑点。
5.取本品5g,加硅藻土2g,研匀。加乙醇20ml,滤过,滤液置水浴上蒸干,残渣加水10ml使溶解,再加盐酸1ml,置沸水浴中加热水解30分钟,冷却,用乙醚提取2次,每次20ml,合并乙醚提取液,蒸干,残渣加氯仿1ml使溶解,作为供试品溶液。另取大黄素对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验,吸取上述供试品溶液5μl,对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30-60℃)-醋酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光斑点;置氨蒸气中熏后,日光下检视,斑点变为红色。
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(实习编辑:陈广海)
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